平板计数法概述
平板计数法（Plate Counting Method）是一种经典的微生物学实验技术，用于测定样品中的活菌数量。该方法基于微生物在固体培养基上生长繁殖形成菌落的原理，通过统计菌落数量来估算样品中的活菌数。
原理
每个活菌在适宜的培养基和条件下能够生长繁殖形成一个菌落，一个菌落代表一个活菌。通过稀释样品并接种到平板上，培养后统计菌落数量，即可计算出样品中的活菌数。
操作步骤
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样品稀释：将待测样品进行一系列10倍稀释，通常稀释至10⁻⁶或更高。
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接种：取一定量的稀释菌液（如0.1 mL或0.2 mL）接种到平板上，可采用倾注法或涂布法。
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培养：将平板倒置放入培养箱中，在适宜温度（如37℃）下培养24-48小时。
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计数：选择菌落数在30-300之间的平板进行计数，避免菌落过于密集或稀疏。
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计算：根据稀释倍数和菌落数计算样品中的活菌数，结果以CFU/mL或CFU/g表示。
结果计算
以稀释度为10⁻⁴的平板为例，若菌落数分别为236和245，则计算公式为： 最终结果通常报告为2.4×10⁶ CFU/mL。
优点与局限性
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优点：能够直接测定活菌数量，操作简单，成本低，适用于多种样品。
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局限性：操作要求高，需确保样品中的微生物充分分散；某些微生物可能因培养条件不适宜而无法生长。
应用
平板计数法广泛应用于食品工业、药品检测、环境监测等领域，用于评估样品中的微生物污染程度。
注意事项
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稀释度选择：选择合适的稀释度，使平板上的菌落数在30-300之间。
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无菌操作：严格遵循无菌操作，避免污染。
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培养条件：根据目标微生物选择合适的培养基和温度。
通过平板计数法，可以有效评估样品中的活菌数量，为微生物学研究和质量控制提供重要数据。
